因此,寻找和开发食品级安全健康的促消化饮料可能是改善上述疾病的重要环节。雪梨味道甘甜且性偏寒,其中含有丰富的糖类与苹果酸,此外还富含维生素B1、维生素B、维生素C以及胡萝卜素等成分。研究表明,梨具有清热生津、养血生肌、止咳祛痰的生理功效,是一种健康的食药两用水果。南果梨是辽宁省的特产水果,后熟后香气浓郁,果肉呈软溶质地且汁水充足,含有大量微量元素,有抗氧化、防治心血管疾病等重要功效,被誉为“梨中之王。随着消费者需求的增加,梨果加工业正逐步向产品多元化与高端化方向推进。
陈皮中的挥发油具有祛痰镇咳、行气平喘等功效,对胃肠道有温和的刺激作用,可促进消化液分泌。山楂具有健脾开胃、消食化滞等功能。玫瑰茄具有抗肿瘤、抗氧化、降血脂、保护肝细胞等作用。本文通过单因素试验与正交试验优化陈皮山楂玫瑰茄复合梨汤饮料配方和加工工艺,以感官评分为主要评价指标,结合总酚含量、总黄酮含量及抗氧化能力测定结果,确定最佳工艺参数。同时运用网络药理学的方法,探究其有效成分对FD网络的作用机制,进而预测出复合梨汤饮料中促消化的活性化合物以及对应的靶点蛋白,以期为FD的辅助调理开发一款营养丰富、口感优异的梨汤饮料。
材料与方法
01材料与试剂
雪梨、南果梨:市售;冰糖:云南滇鹏糖业有限公司;陈皮、山楂、玫瑰茄:健之佳医药连锁集团股份有限公司;柠檬酸(食品级):石药集团有限公司;没食子酸、芦丁(纯度均>98%)、福林酚试剂、碳酸钠、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-di-pheny+2-picryhydrazyl,DPPH)、水杨酸、无水乙醇、三氯化铁、铁氰化钾、三氯乙酸、硫酸亚铁(均为分析纯):天津市天力化学试剂有限公司。
02感官评价
由20名经培训的专业饮料品评员(10男10女)组成评价小组,感官评价小组根据设计的感官评价标准对CPB-THR进行感官评价,总分为100,结果取平均值。CPB-THR感官评分标准如表2所示。
结果与分析
01单因素试验结果
单因素试验结果见图1。
由图1A可知,当炖煮时间在25~35 min时,CPB-THR的感官评分较高(P<0.05)。此时饮料具有协调的复合香气和适口滋味,消费者接受度高。其中,炖煮时间为30 min时感官评分达到最大值(74.40+4.32)(P<0.05)。当炖煮时间继续延长时,感官评分呈急剧下降趋势(P<0.05)。由此可见,较短的炖煮时间难以充分激发原料中的风味物质,这使得CPB-THR的口感变得寡淡,导致感官评分较低,消费者接受度较低。但是炖煮时间过长会带来明显的风味缺陷,掩盖了原料本身的天然香甜味道,对感官评分产生负面影响。综合考虑,本研究选取炖煮时间25、30、35 min进行后续正交试验。由图18可知,陈皮添加量对CPB-THR的可接受性存在较显著的影响。当陈皮添加量大于2.0%时,感官评分明显下降,这可能与陈皮中含有的橘皮苷、川陈皮素等苦味物质随着陈皮添加量的增多在饮料中不断累积有关。
综合考虑,本研究选取陈皮添加量1.0%、2.0%、3.0%进行后续正交试验。
由图1C可知,当山楂添加量1.0%~1.4%时候均有较高的CPB-THR感官评分(P<0.05),在添加量为1.0%时候到达最大值(75.2+4.4)。在添加量大于1.4%时感官评分急剧降低(P<0.05),可能由于山楂添加量的增加,山楂中柠檬酸、苹果酸等酸性成分大量富集,导致饮料出现明显涩味。综合考虑,选取山楂添加量0.6%、1.0%、1.4%进行后续正交试验。
由图1D可知,在玫瑰茄添加量为0.6%时CPB-THR的感官评分出现峰值,这可能与玫瑰茄中含有的柠檬酸、苹果酸等有机酸随着玫瑰茄添加量的增加在饮料中不断累积有关。综合考虑,本研究选取玫瑰茄添加量0.2%、0.6%和1.0%进行后续正交试验。
02CPB‐THR配方正交试验结果
与分析正交试验结果如表3所示,主体间效应检验见表4。由表3可知,CPB-THR的感官评分受多种因素综合影响。各因素作用主次顺序为A>C>B>D。由表4可知,炖煮时间、陈皮添加量、山楂添加量和玫瑰茄添加量均对CPB-THR感官品质存在极显著影响(P<0.001)。最优配方组合为AzB,CgD2,即炖煮时间为30min,陈皮添加量为2.0%,山楂添加量为1.4%,玫瑰茄添加量为0.6%。最佳组合A2B,CaD2未出现在正交试验中,需要进行验证试验。验证最佳组合A2B,CaD,所得感官评分为82.30,大于正交试验最高得分80.20,表明正交试验优化所得结果具有可靠性。
结论
通过单因素试验结合正交优化试验,得到CPB-THR的最佳工艺参数为炖煮时间30 min,陈皮添加量2.0%,山楂添加量1.4%,玫瑰茄添加量0.6%。此条件下复合梨汤饮料的总酚含量为94.75 mg/L,总黄酮为含量112.5 mg/L.DPPH自由基清除率为89.5%,羟基自由基清除率为76.4%,铁离子还原能力为0.82。
通过中药系统药理学分析平台(TCMSP),从CPB-THR中筛选得到592个有效活性成分,并获取了这些成分对应的蛋白靶点信息。同时,通过Gene Cards数据库筛选出FD相关的靶点基因,经在线韦恩图平台分析,选出了310个药物与疾病的交集靶点。进一步的核心靶点分析表明,类固醇受体辅激活因子(SRC)、蛋白激酶Ba(AKT1)、磷脂酰肌醇3·激酶(PIK3R1)、丝裂原活化蛋白激酶激酶1(RAF1)、表皮生长因子受体(EGFR)等在CPB-THR干预FD的过程中发挥着关键作用,是其发挥药效的核心靶点。KEGG通路富集分析结果显示,PI3K·Akt通路、脂质与动脉粥样硬化通路、AGE·RAGE信号通路等是CPB-THR发挥作用的主要信号通路;结合GO功能富集分析结果,可推测该复合梨汤饮料可能通过协同调控上述核心靶点及信号通路,实现促进胃肠动力、改善胃肠道屏障功能及调节肠道微环境等多种生物学效应,进而达到对FD的辅助调理作用。
本研究借助网络药理学的技术与方法展开探究,虽存在一定局限性,但从药物成分靶标与疾病靶标的关联切入,初步预测了CPBTHR治疗功能性消化不良(FD)的关键作用蛋白,探讨了其在治疗FD中的潜在作用机制,为后续运用分子生物学手段开展验证提供参考。


